问题补充说明:bca法测定蛋白质浓度时,需要用参比溶液调0么,像平时测吸光度都需要先用参比溶液调0再测,看试剂盒说明书好像没说到要调0 的,其次稀释液是不是用裂解液合适呢,另外做了标准曲线后,在562nm下比色,这比色的步骤是什么呢
Bicinchoninicacid(BCA)法是在世界上常用的蛋白浓度扬下假前相爱诗音院除确检验方法之一BCA法基础上改进而成。其原理与Lowery法蛋白定量相似,即在碱性环境下蛋白质与Cu间收福预各实温建2+络合并将Cu2+还原成Cu+。两分子BCA与一个Cu+螯合形成稳定的紫蓝色衡西节局校复合物,在562nm处有高的光吸收值并与蛋白联奏在展质浓度成正比,据此可测定蛋白部殖死质浓度。
组成与储存:
组分名称规格保存
BCA频Reagent100ml2-8℃
CuReagent3.0ml2-8℃
BSA标准液5mg/ml1ml-20ºC冻存
可进行500T微板(microplate)测定或50T2ml比色杯测定。
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