最近几年基因编辑技术异常火爆，CRISPR/Cas9技术面世以后，弥补了刘法准指皇得传统基因编辑技术的诸多不足，使得基因的“任意编辑”变得越来越容易。也因此，CRISPR/Cas9技术当仁不让的成为基因编辑技术的“王牌”，大有一副取而代之的势头。所以这里就给大家简单介绍一下CRISPR/Cas9的技术原理！
一、CRISPR/Cas9系统的构成
CRISPR(clustered,regularl们阿为做言yinterspaced,shortpalind假西白倍划济四章romicrepeats)是一种来自细菌降解入侵的病毒DNA或其他外源DNA的免疫机制。在细菌及古细菌中，CRISPR系统共分成3类，其中Ⅰ类和Ⅲ类需要多种CRISPR相关蛋白（Cas蛋白）共同发挥作用，而Ⅱ类系统只需要一种Cas蛋白即可，这为其能够广泛应用提供了便利条件。目前，来自Strepto所厂扬coccuspyogenes的CRISPR/Cas9系统应用最为广泛。
Cas9蛋白（含有两个核酸酶结构域，可以分别切割DNA两条单造福神受读车承首运链。Cas9首先与cr在银RNA及tracrRNA结合成复合物，然后通过PAM序列结合并侵入DNA，形成RNA-DNA复合结构，进而对目的DNA双链进行切割，使DNA双链断裂。
研究陆乙打质职特材人员为了将CRIS硫率见支表合代右PR/Cas9技术发展为高效的基因打靶工具，又进行了优化和改造。Cong,L.等人[1]在不影响系统效率的情况下，将crRNA和tracrRNA融合为一条RNA。通过这种简化，CRISPR/Cas9系统现仅包括两个元素：Cas9蛋白和sgRNA（singleguideRNA）。因此现在人们将CRISPR/Cas9技术也称为Cas9/sgRNA技术。
二、CRISPR/Cas9技术的基因编辑机制
CRISPR/Cas9通过对预款德案航盟直劳酸设的DNA位点进行切割，造成DNA双链断裂（DSB,doublestrandbreak）。这种DNA的损伤可以启动和居绿适细胞内的修复机制，主要包括两种途径：
一是低保真性的非同源末端连接途径（NHEJ，Non-homologousendjoin齐引温缺水故ing），此修复机制非常容易发生错误，导致修复后发生碱基的缺失或插入（Ind别况灯攻复松反磁类el），从而造成移码突变，最终达到基因敲除的目计刚联充交在总击的。NHEJ是细胞内主要的DNA断裂损伤修复措香般内式达建爱力特机制。利用靶向核酸酶可以在受精卵水平高效的实现移码突变，从而制备基因敲除模式动物。CRISPR/Cas9技术的出现，使得无需再使用相应物种的ES细胞系就可以制备止基因敲除模式生物，且已升推护部岁食品味那伯成功应用于小鼠[5]容别其诉较复金大音吧微、大鼠[6]、猪[7]、灵长类[8]、果蝇[9]等等。
第二种DNA断裂修复途径为同源介导的修复（HR,homology-directedrepair），这种基鸡源娘另水星责握合罪既于同源重组的修复机制保真性高，但是发生概率低。在提供外源修复模板的情况下，靶向核酸酶对DNA的切割可以将同源重组发生的概率提高约1000倍[10]。利用这种机制可以实现基因组的精确编辑，如：条件性基因敲除、基因敲进、基因替换、点突变等等。
CRISPR/Cas9技术以自己操作的便捷性，高效的基因编辑能力获得青睐，成为当下科研工作者的新宠儿。各大实验室纷纷加入开发CARISPR/Cas9技术的行列中，媒体也将之评为21世纪最有影响的十大技术之一。让我们跟随CRISPR/Cas9技术的脚步一起加强科研基础的建设，推动生物科研的进步！
详细信息你可以参考：http://www.***.cn/show_2/1733.html
标签：crisp,cas9,资料
